實(shí)驗(yàn)室GC氣相色譜儀發(fā)展現(xiàn)狀分析

　　實(shí)驗(yàn)室GC氣相色譜儀是色譜法中zui古老的一種,但通過改進(jìn)填料的粒度及柱壓,在經(jīng)典的液相柱色譜的基礎(chǔ)上引入了氣相色譜的塔板理論,在技術(shù)上采用了高壓輸液泵,固定相和高靈敏度的檢測器,實(shí)現(xiàn)了分析速度快、分離效率高和操作自動化,這種色譜技術(shù)被稱為液相色譜法（HighperformanceliquidchromatographyHPLC）。中藥的成分非常復(fù)雜,以往常用的薄層色譜等方法因其精密度、準(zhǔn)確度、靈敏度、重現(xiàn)性差而不能滿足現(xiàn)代中藥的需要。液相色譜正是以其穩(wěn)定、可靠、的特點(diǎn)成為中藥研究的zui重要的分析方法。目前液相色譜已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物堿、皂苷、黃酮、蒽醌、香豆素等各種中藥有效成分的測定。近年來對液相色譜監(jiān)測中藥的研究非常多,由于液相色譜集經(jīng)典液相色譜和氣相色譜的優(yōu)勢于一身,無論柱效、選擇性還是分析程度都達(dá)到或超過了它們,近年來對液相色譜的不足之處進(jìn)行了改進(jìn),使這項(xiàng)技術(shù)日臻完善。

　　實(shí)驗(yàn)室GC氣相色譜儀發(fā)展近況

　　實(shí)驗(yàn)室GC氣相色譜儀在藥物分析中的應(yīng)用,主要考慮試樣的預(yù)處理和分析柱、檢測器的選擇。在試樣的預(yù)處理上,日前興起的固相（微）萃取使得許多含量低的成分得到精制提純,從而適于液相色譜的測定,而孫新國采用逆流萃取測定川芎嗪含量取得了很好的效果。中藥中有些紫外吸收弱,或無特征紫外吸收的成分,直接用液相色譜測定,其靈敏度和分離度都不盡人意,利用柱前或柱后衍生化法可使這些成分較地測定出來。對于極性大、脂溶性差物質(zhì),在YWGCl8柱上不易保留,用十二烷基磺酸鈉作為離子對試劑,降低其極性,延長柱上的保留時(shí)間,取得較好的分離較果。

　　將液相色譜和質(zhì)譜這兩個強(qiáng)有力的分析技術(shù)在線連接在一起,經(jīng)過三十年的發(fā)展已成為一項(xiàng)較為成熟的分析手段,但是它從形成伊始就存在著問題:從液相色譜流進(jìn)質(zhì)譜時(shí),流動相的變化、溶劑的組成、高溫高壓離子化的問題制約著這種聯(lián)用技術(shù)發(fā)展,大氣壓離子化接口具有去除溶劑和離子化的雙重功效,它的引入,使得該技術(shù)在各個領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。電噴霧離子源是一種軟電離技術(shù),一般只生成（MH）和（M-H）-兩種分子離子峰,選擇性監(jiān)測（mz）190的負(fù)分子離子峰,具有較高的靈敏度、準(zhǔn)確度、專一性,滿足了低濃度藥物研究的需求。由張莉等人研究的三維液相色譜法可以同步測定葛根素和阿魏酸兩種指標(biāo)。

　　通過實(shí)驗(yàn)證明:如果選擇合適的柱溫等色譜條件,乙醇作為反相液相色譜流動相,分析中藥及中成藥中有效成分,既安全又準(zhǔn)確。結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì),普通的檢測器難以檢測出來,液相色譜-電化學(xué)法可以有效地測定黃連粉中僅差一個基團(tuán)的黃芩苷和黃芩素的含量。樣品經(jīng)色譜柱分離后收集,再經(jīng)熒光分光光度計(jì)測熒光強(qiáng)度,影響因素多,測定復(fù)雜,改進(jìn)后的液相色譜-熒光法則可以不經(jīng)衍生化和收集分離物,只經(jīng)化學(xué)處理除雜,濃縮后直接進(jìn)樣即可。用該法測定貫葉連翹中金絲桃素的含量也取得了較好的結(jié)果。液相色譜-示差折光測黃芪精口服液中黃芪甲苷的含量也都取得了較為滿意的結(jié)果。對于只有紫外末端吸收,用紫外檢測時(shí)靈敏度低,基線易漂移,示差折光檢測其易受外界條件干擾,蒸發(fā)散射檢測器能克服以上不足,響應(yīng)值只與樣品質(zhì)量有關(guān),其信號相應(yīng)與質(zhì)量成正比,不同化合物,質(zhì)量相同則信號相應(yīng)基本一致。

　　蒸發(fā)光散射檢測法是基于不揮發(fā)樣品分子對光的散射程度與其質(zhì)量成正比,與其所含基團(tuán)性質(zhì)無關(guān)。只要選擇適當(dāng)?shù)臋z測器參數(shù),便可使流動相和溶劑*氣化,不產(chǎn)生信號,而樣品中的各個組分以不揮發(fā)粒子存在,對光有散射,以被檢測出來。因此,蒸發(fā)光散射檢測器可用于含不同基團(tuán)的多組分同時(shí)分離、分析。和紫外、熒光等方法相比,蒸發(fā)光散射檢測法對不同物質(zhì)有近似相同的響應(yīng)因子。

　　因而不出現(xiàn)低濃度、高響應(yīng)或高濃度、低響應(yīng)的現(xiàn)象,有利于不同比例混合物的準(zhǔn)確測定.液相色譜-蒸發(fā)光散射檢驗(yàn)法測定銀杏葉中萜類內(nèi)酯含量、紅參及育精膠囊中人參皂苷Rg1和Re的含量和藤黃中藤黃酸含量都得到了很好的結(jié)果。

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